■ 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
EGY48 酵母菌可用單雙雜實(shí)驗(yàn)，轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行互作驗(yàn)證或篩庫(kù)試驗(yàn)。篩選標(biāo)記為：his3，trp1，ura3 。EGY48-LacZ 酵母單雜系統(tǒng)需要 pB42AD 和 pLacZi 兩種質(zhì)粒配套使用。質(zhì)粒 pB42AD 的篩選標(biāo)記為 TRP1 ，用于表達(dá)AD（來(lái)自皰疹病毒的88個(gè)氨基酸殘基組成的B42AD蛋白）與目標(biāo)蛋白（Prey）的融合蛋白。質(zhì)粒pLacZi的篩選標(biāo)志為 URA3 ，報(bào)告基因?yàn)?LacZ ，只有當(dāng) Bait 和 Prey 互作時(shí)才能啟動(dòng) LacZ 表達(dá)，在顯色培養(yǎng)基上顯藍(lán)色，從而確定 DNA 和蛋白有相互。本方案結(jié)合 LacZ 基因胞外表達(dá)顯色試劑盒進(jìn)行互作驗(yàn)證，采用稀釋點(diǎn)板的方法，與涂板的方法相比，更能直觀的體現(xiàn)出 DNA 和蛋白的互作，還能減少培養(yǎng)基的使用。
■ 注意事項(xiàng)：
載體注意事項(xiàng)：
1. 建議收到質(zhì)粒后請(qǐng)先轉(zhuǎn)化感受態(tài)（克隆菌株），再挑選單菌落重新提取后使用。
2. 轉(zhuǎn)化前請(qǐng)準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒對(duì)應(yīng)的抗生素、抗生素濃度、感受態(tài)（克隆菌株）和培養(yǎng)溫度。
3. 如有必要請(qǐng)測(cè)序后使用，我司網(wǎng)站檢索對(duì)應(yīng)貨號(hào)可下載質(zhì)粒圖譜。
培養(yǎng)基注意事項(xiàng)：
1. 一般情況下 pH 值不必調(diào)節(jié)，建議測(cè)定一下 pH5.8±0.2 即可。
2. SD 培養(yǎng)基可能溶解不徹底或滅菌后有少量沉淀，不影響實(shí)驗(yàn)進(jìn)行。
3. SD 培養(yǎng)基滅菌后，顏色為白色至淺黃色。
感受態(tài)注意事項(xiàng)：
1. 一支感受態(tài)不建議分成兩份使用。
2. 如果轉(zhuǎn)化效率低，只有幾個(gè)單克隆，建議做 PCR 鑒定。
3. 篩選出來(lái)的單克隆，一般是圓形凸起、邊緣整齊、表面光滑濕潤(rùn)、不透明、乳白色-淺黃- 淺粉色的菌落，有酵母氣味。
本試劑盒注意事項(xiàng)：
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療，食品及化妝品等用途。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。
